UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN

Facultad de Ciencias Biológicas

Escuela profesional de Biología

ASIGNATURA: BOTÁNICA FANEROGÁMICA

PRÁCTICA 3 “pH Y SOLUCIONES AMORTIGUADORAS”

Grupo: Miercoles (7:00 – 10:20 p.m.)

Alumno: Cárdenas Condori, Gerardo Sebastián

Docentes: Navarro Oviedo, Ronald Demetrio

Fecha de entrega: 28/09/2022

Arequipa – Perú
2022
1. INTRODUCCIÓN

Es de conocimiento del público general que los sistemas biológicos funcionan y

están diseñados para ciertos niveles de pH específicos que no pueden variar
mucho ya que podrían afectar terriblemente el desenvolvimiento de los mismos,
por lo que no es extraño esperar que el cuerpo cuente con mecanismos para
controlar esta variable tan importante, en este caso hablamos de los buffers,
sistemas amortiguadores o tampones. En el presente trabajo revisaremos el
cómo funcionan los buffers, las características de los ácidos y bases, además,
veremos como es que podemos crear soluciones buffers y veremos los cambios
que estos presentan en cuanto a pH al reaccionar frente a bases y ácidos fuertes,
así mismo aprenderemos a realizar el cálculo para hallar el pH de una solución
ya sea mediante indicadores o mediante instrumentos como un pHmetro, como
siempre, en un medio acuoso, ya que el agua es el principal componente donde
se desarrollan la mayoría de los procesos biológicos. Por lo tanto, es
fundamental conocer a fondo las propiedades de los ácidos y las bases de un
sistema amortiguador.

2. OBJETIVOS
General
Describir los conceptos de ácidos, bases , pH, indicadores de pH y sistemas
amortiguadores y así mismo el sistema de creación de un sistema
amortiguador
Específicos
• Determinar el pH mediante el uso de indicadores
• Explicar los cambios en el pH que se llevan a cabo en una solución de un
ácido fuerte con una base fuerte
• Explicar los cambios en el pH que se llevan a cabo en una solución de un
ácido débil con una base fuerte
• Explicar el procedimiento para realizar una solución amortiguadora a
cualquier pH y con reactivos a cualquier concentración
3. MATERIALES Y MÉTODOS

EXPERIMENTO 1. DETERMINACION DEL pH MEDIANTE USO DE

INDICADORES y pHMETRO
MATERIALES
Indicador Universal, Fenolftaleína Anaranjado de metilo.
Muestras diluidas 1:10 de agua, soluciones de diferentes ácidos, jugo de
naranja, limón, bebidas gasificadas, agua embotellada, etc.
MÉTODOS
1) En un tubo de ensayo pipeteamos 2 ml de cada muestra,
2) Agregamos dos gotas de indicador universal y observamos el color.
3) Repitimos el experimento con otros indicadores comparando los
colores de las muestras con las formas ácida, intermedia y básica del
indicador

EXPERIMENTO 2. TITULACION DE UN ACIDO FUERTE CON UNA BASE

FUERTE
MATERIALES
Buretas pHmetro de inmersión
Beakers de 50 ml
Baguetas
Pipetas de 5 ml
HCl 0.1 N (solución valorada)
Fenolftaleína 1%
NaOH o KOH 0.1 N (solución valorada)
Anaranjado de metilo 0.1%
MÉTODOS
1) En un beaker de 50 ml pipeteamos 10 ml de HCl 0.1 N y medimos el
pH con ayuda del pH-metro y agregamos 3 gotas de fenolftaleína.
2) Seguidamente titulamos esta solución con NaOH 0.1 Ny medimos el
pH después de agregar 1 ml de álcali.
3) Cuando se aproxime al punto final de la titulación, reducimos la
cantidad de álcali agregada, hasta obtener un cambio razonable en el
pH.
EXPERIMENTO 3. TITULACION DE UN ACIDO DEBIL CON UNA BASE
FUERTE: DETERMINACION DEL pKa DEL ÁCIDO ACETICO
MATERIALES
Beakers de 50 ml
pHmetro
Bagueta
Acido acético 0.1 N
NaOH 0.1 N
MÉTODOS
1) Titúlamos 10 ml de ácido acético 0.1 N con NaOH 0.1 N y anotamos el
pH para cada mililitrode álcali añadido.
2) Durante la práctica calculamos teóricamente, los valores de pH para
0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ml de álcali añadido, usando
las fórmulas de disociación de ácidos débiles, la ecuación de
Henderson-Hasselbalch y la de disociación de sales

EXPERIMENTO 4. BUFFER FOSFATO Y CAPACIDAD TAMPON

MATERIALES
Beakers de 50 ml
pHmetro
Goteros
Bagueta
Pipetas de 10 ml
Solución 0.2 M de fosfato monobásico de sodio, pKa 6.8 (27.8 g de
NaH2PO4 en 1000ml de agua destilada)
Solución 0.2 M de fosfato dibásico de sodio (53.65 g de Na2HPO4 ó 71.7
g de Na2HPO4. 12H2O en 1000 ml de agua destilada)
MÉTODOS
1) Calculamos la relación y los ml de NaH2PO4 0.2 M y de Na2HPO4 0.2
M requerida para obtener 100 ml de una solución de pH 6.
2) Diluimos estos 100 ml hasta 200 ml para obtener unbuffer fosfato 0.1
M.
 4. RESULTADOS
EXPERIMENTO 1. DETERMINACION DEL pH MEDIANTE USO DE
INDICADORES y pHMETRO
Indicador Fenolftaleina Anaranjado de pHmetro
Universal metilo
Color pH Color pH Color pH pH
Jugo de naranja 6 incoloro ácido naranja Entre 3.9
3.1 y 4.4
naranja
HCl 0.1 N Rojo 4 incoloro ácido rojo Menor a 1
3.1
Jugo de Rojo 4 Incoloro ácido rojo Menor a 2.4
3.1
limón
NaOH 0.1 Violeta Mayor Rojo básico Naranja Mayor a 13
a 10 grocella 4.4
N
Gaseosa rojo 4 incoloro Ácido amarillo Menor 2.8
que 4.4

EXPERIMENTO 2. TITULACION DE UN ACIDO FUERTE CON UNA BASE

FUERTE
NaOH 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
0.1
N(ml)
pH Exp 1.1 1.2 1.3 1.4 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0 2.1 2.3 2.5 3.2 11.9 12.5
pH Teór 1 1.09 1.22 1.30 1.39 1.52 1.69 1.76 1.95 2.301 7 11.68 11.95 12.12 12.21

ph frente a concentración de NaOH

14
11.6811.9512.1212.21
12 y = 0.9231x - 1.7831
10
8 7

6
Ph

4 2.3
1.95
1.22 1.3 1.39 1.52 1.69 1.76
2 1 1.09
0
-2 0 2 4 6 8 10 12 14 16

-4
Concentración NaOH
 EXPERIMENTO 3. TITULACION DE UN ACIDO DEBIL CON UNA BASE
FUERTE: DETERMINACION DEL pKa DEL ÁCIDO ACETICO
NaOH 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
0.1
N(ml)
pH Exp 3 3.8 4.2 4.4 4.6 4.8 5 5.2 5.4 5.8 6.3 11.8 12.4 - -
pH Teór 2.9 3.8 4.14 4.38 4.57 4.75 4.83 5.11 5.35 5.7 9.375 11.68 11.95 12.12 12.21

ph frente a concentración de NaOH

14
12.21
11.6811.9512.12
12 y = 0.715x + 1.8533
9.38
10

8
pH

5.35 5.7
6 4.38 4.57 4.75 4.83 5.11
3.8 4.14
4 2.9

0
0 2 4 6 8 10 12 14 16
Concentración NaOh

EXPERIMENTO 4. BUFFER FOSFATO Y CAPACIDAD TAMPON

Para hallar la relación entre los ml de NaH2PO4 0.2 M y de Na2HPO4 0.2 M
requerida para obtener 100 ml de una solución de pH 6. Usamos la ecuación
de Henderson-Hasselbach

[𝑠𝑎𝑙 ]
𝑝ℎ = 𝑝𝐾𝑎 + 𝑙𝑜𝑔
[á𝑐𝑖𝑑𝑜]
[𝑠𝑎𝑙]
6 = 6.8 + 𝑙𝑜𝑔
[á𝑐𝑖𝑑𝑜]
[𝑠𝑎𝑙]
−0.8 = 𝑙𝑜𝑔
[á𝑐𝑖𝑑𝑜]
[𝑠𝑎𝑙]
𝑎𝑛𝑡𝑖𝑙𝑜𝑔 0.8 = = 0.158
[á𝑐𝑖𝑑𝑜]
0.158 es la cantidad de moles de sal que hay por 1 mol de ácido, por que se
puede saber la cantidad de moles exacta en la disolución
0.158
𝑁𝑎𝐻2𝑃𝑂4 = = 0.136 𝑥 0.2 𝑀 = 0.0272 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠
1.158
 1
𝑁𝑎2𝐻𝑃𝑂4 = = 0.8635 𝑥 0.2 𝑀 = 0.172 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠
1.158
Con estos datos sabemos que necesitaos 0.0272 moles de 𝑁𝑎𝐻2𝑃𝑂4 a 0.2
M en la solución para hacer un buffer de 6 pH, por lo que ahora necesitamos
saber la equivalencia en volúmen (ml) que debemos agregar.
1000 𝑚𝑙 = 0.2 𝑀
𝑥 = 0.0272 𝑀
𝑥 = 136 𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝑁𝑎𝐻2𝑃𝑂4
Del mismo modo con el Na2HPO4
1000 𝑚𝑙 = 0.2 𝑀
𝑥 = 0.172 𝑀
𝑥 = 864 𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝑁𝑎2𝐻𝑃𝑂4
Ahora tenemos una solución de buffer Na2HPO4 y NaH2PO4 con un pH 6
con un volúmen de 1000 ml , pero nos pidieron además que sacaramos
100ml del buffer y los disolvieramos en agua para obtener un buffer fosfato
de 200ml a 0.1M
Por lo que simplemente agregamos 100 ml de agua para obtener un 200 ml
de buffer al 0.1M

5. DISCUSIÓN
Con respecto al experimento 1, no hay mucho que decir, se observó que
hubieron variaciones muy grandes con respecto al pH que marcaban los
indicadores con respecto al que marcaba el pHmetro, por lo que se puede
decir que estos son imprecisos, pero dan una idea de hacia que lado de la
balanza se encuentra una sustancia, hacia el lado ácido o el lado básico
Con respecto al experimento 2, Para hallar teóricamente los resultados del
pH que deberían obetenerse al mezclar 10 ml de HCl 0.1 N con una cantidad
X (0,1,2,3,4,5,6,etc) de ml de NaOH 0.1 N se utilizó la siguiente formula
𝑝𝐻 = − log[á𝑐𝑖𝑑𝑜]
Pero com agregamos una base fuerte a un ácido fuerte, es lógico intuir que
las cantidades de NaOH que agreguemos se neutralizaran con las de HCl ya
presentes y además aumentaran el volumen de la disolución, por lo que antes
de querer hallar el ph de la solución debemos hallar la nueva concentración
del ácido. Asi que utilizamos esta fórmula
 𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2
Entonces, cuando agreguemos 0 ml de NaOh, no se neutralizará nada, por
lo que podemos proceder con la primera formula con normalidad, por su
parte, cuando agreguemos, 1 ml, hallaremos que 1ml de NaOH se ha
neutralizado con 1 ml de HCl y que el volúmen ahora es de 11ml en total, por
lo que aplicando la formula del volúmen y la concentración, tendríamos que:

Para 1 ml de NaOH =
𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2
9𝑥0.1𝑀 = 11𝑥 𝐶
𝐶2 = 0.081 𝑀
Entonces procederíamos a hallar el pH de la nueva disolución
𝑝𝐻 = − log[á𝑐𝑖𝑑𝑜]
𝑝𝐻 = − log[0.081]
𝑝𝐻 = 1.09
Para 2 ml de NaOH =
𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2
8𝑥0.1𝑀 = 12𝑥 𝐶
𝐶2 = 0.06 𝑀
Entonces procederíamos a hallar el pH de la nueva disolución
𝑝𝐻 = − log[á𝑐𝑖𝑑𝑜]
𝑝𝐻 = − log[0.06]
𝑝𝐻 = 1.22

Y así continuaríamos hasta llegar a la cantidad de 10 ml de NaOH añadidos

para 10 ml de HCl, siendo en este caso el que la totalidad de la base y del
ácido se han neutralizado, por lo que sería de esperarse un pH neutro, el cual
es de 7
La cosa cambia cuando llegamos a 11 ml de NaOH, por lo que tenemos que
no hay más ácido que neutralizar y por su parte un exceso de base, para
este caso tenemos que volver a aplicar la formula de las concentraciones.
𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2
1𝑥0.1𝑀 = 21𝑥 𝐶
 𝐶2 = 0.004 𝑀
Y ahora procederíamos a hallar el pH, solo que en este caso usaríamos la
formula para hallar el pOH primero, ya que estamos trabajando con una base
y no con un ácido.
𝑝𝑂𝐻 = − log[𝑏𝑎𝑠𝑒]
𝑝𝑂𝐻 = − log[0.0047]
𝑝𝑂𝐻 = 2.32
Entonces procedemos con el pH
𝑝𝐻 = 14 − 𝑝𝑂𝐻
𝑝𝐻 = 14 − 2.32
𝑝𝐻 = 11.68
Del mismo procederemos como en la primera parte
Para 12 ml de NaOH
𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2
2𝑥0.1𝑀 = 22𝑥 𝐶
𝐶2 = 0.009 𝑀

𝑝𝑂𝐻 = − log[𝑏𝑎𝑠𝑒]
𝑝𝑂𝐻 = − log[0.009]
𝑝𝑂𝐻 = 2.045

𝑝𝐻 = 14 − 𝑝𝑂𝐻
𝑝𝐻 = 14 − 2.045
𝑝𝐻 = 11.95
Para 13 ml de NaOH
𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2
3𝑥0.1𝑀 = 23𝑥 𝐶
𝐶2 = 0.013 𝑀

𝑝𝑂𝐻 = − log[𝑏𝑎𝑠𝑒]
𝑝𝑂𝐻 = − log[0.013]
𝑝𝑂𝐻 = 1.886
 𝑝𝐻 = 14 − 𝑝𝑂𝐻
𝑝𝐻 = 14 − 1.886
𝑝𝐻 = 12.12
Con respecto al experimento 3 pudimos observar que el procedimiento es
bastante similar al 2, pero hay que tener en cuenta que se están trabajando
con ácidos débiles, como lo es el ácido acético, el cual no se disocia
completamente, por lo que el pH, depende del pKa del mismo. Usamos la
siguiente formula
𝑝𝐾𝑎 − log [á𝑐𝑖𝑑𝑜]
𝑝𝐻 =
2
Por lo que reemplazando tendríamos que con 0 ml de NaOh
4.8 − log [0.1]
𝑝𝐻 =
2

4.8 − 1
𝑝𝐻 =
2
𝑝𝐻 = 1.9
Para el caso de 1 ml, observamos un comportamiento de neutralización
similar al del experimento 2, por lo que aplicaremos la misma regla de las
concentraciones
𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2
Y luego la formula para hallar el ph de un ácido débil
𝑝𝐾𝑎 − log [á𝑐𝑖𝑑𝑜]
𝑝𝐻 =
2
Cuando se cancelen todos los ml de ácido y de base, tendremos que aplicar
un prcedimiento similar al del ejercicio 2. Teniendo en cuenta que al añadir
un ácido débil + una base se forma una sal, tenemos que considerar la
cantidad de sal que se va a formar a continuación, considerando los
miliequivalentes para conocer la concentración de sal, tendríamos que aplicar
la siguiente formula
𝑀
𝑚𝐸𝑞 = 𝑉 (𝑚𝑙 )𝑥𝐶( )
𝑁
Donde por cada ml de NaOH, estaremos obteniendo 0.1 mEq de
sal,entonces, al saber la concentración de la sal, ahora podemos hallar el pH,
aplicando la siguiente formula
 𝑝𝐾𝑎 + log [𝑠𝑎𝑙]
𝑝𝐻 = 7 +
2

Con respecto al experimento 4 se pudo observar que para la creación de

un sistema amortiguador se deben seguir pasos muy especificos si se quieren
llegar a pH especificos, por su parte, es necesario conocer el pKa, de los
ácidos o en su caso el pKb de las bases que se vayan a usar para poder
hallar la relación que debe usarse para formar un sistema amortiguador,
además de sus concentraciones
6. CONCLUSIONES
• Los ácidos son aquellas sustancias capaces de liberar hidrogeniones
y por su parte las bases son sustancias que liberan iones OH,
dependiendo de las concentraciones de estos iones, podemos medir
el pH de una solución y decir si esta es ácida o básica. Por su parte,
los buffers son soluciones capaces de amortiguar el cambio de pH en
una solución, sin importar si se agregan bases fuertes o ácidos fuertes.
• El pH se determina dependiendo del tipo de ácido o base que estemos
utilizando o por su lado dependiendo del tipo de indicador que
utilizemos, aunque estos no suelen ser precisos y solo dan una idea
de que tipo de sustancia es, mas no exactamente su pH
• El pH disminuye y se hace más básico a medida que se agrega una
base, pero es muy brusco el cambio cuando la base fuerte ha sido
totalmente neutralizada
• El pH disminuye y se hace más básico a medida que se agrega una
base, pero es ligeramente brusco el cambio cuando la base debil ha
sido totalmente neutralizada y por su parte empieza con un pH, menos
ácido que una base fuerte
7. CUESTIONARIO
1. Calcular la concentración de protones, en moles por litro de una
solución 1Mde ácidoacético, sabiendo que la Ka del ácido
acético a 25°C es de 1.86 x10 -5

CH3COOH + H20 → H3O + CH3COO

1 0 0

-x +x +x

1-x x x

[𝐶𝐻𝐶𝑂𝑂][𝐻3𝑂]
𝐾𝑎 =
[𝐶𝐻3𝐶𝑂𝑂𝐻]

[𝑥 ][𝑥]
1.86𝑥10−5 =
[1 − 𝑥]

𝑥 = 0.0093 𝑀

𝑝𝐻 = − log[𝑥 ]

𝑝𝐻 = − log[0.0093]

𝑝𝐻 = 2.37

2. Cuál es el pH de las siguientes mezclas de soluciones tampón?

a) Acido acético 1 M más acetato sódico 0.5 M b) Acido fosfórico
0.3 M más KH2PO4 0.8 M

[𝑏𝑎𝑠𝑒]
𝒂) 𝑝𝐻 = 𝑝𝑘𝑎 + 𝑙𝑜𝑔
[á𝑐𝑖𝑑𝑜]

0.5
𝑝𝐻 = 4.8 + 𝑙𝑜𝑔
1.0

𝑝𝐻 = 5.1

[𝑏𝑎𝑠𝑒]
𝒃) 𝑝𝐻 = 𝑝𝑘𝑎 + 𝑙𝑜𝑔
[á𝑐𝑖𝑑𝑜]
 0.8
𝑝𝐻 = 2.2 + 𝑙𝑜𝑔
0.3

𝑝𝐻 = 2.63

3. Supóngase que quiere conseguir un tampón de un pH

exactamente 7.00 utilizando KH2PO4 y Na2HPO4. Si tiene una
solución de KH2PO4 0.1 M. Qué concentración de Na2HPO4
necesitaría?

[𝑏𝑎𝑠𝑒]
𝑝ℎ = 𝑝𝑘𝑎 + 𝑙𝑜𝑔
[á𝑐𝑖𝑑𝑜]

𝑁𝑎2𝐻𝑃𝑂4
7 = 6.86 + 𝑙𝑜𝑔
0.1

𝑁𝑎2𝐻𝑃𝑂4
0.14 = 𝑙𝑜𝑔
0.1

𝑁𝑎2𝐻𝑃𝑂4
𝑎𝑛𝑡𝑖𝑙𝑜𝑔[−0.14] =
0.1

𝑁𝑎2𝐻𝑃𝑂4
= 1.38
0.1

𝑁𝑎2𝐻𝑃𝑂4 = 0.138 𝑀

4. Una muestra de 500 ml de tampón formiato 0.100 M, pH 3.75, se

trata con 5 ml de KOH1.00 M. Qué pH se obtiene tras dicha
adición?.
𝐻𝐶𝑂𝑂𝐻 → 𝐻 + 𝐻𝐶𝑂𝑂
0.05𝑀 → 1.778 𝑥 10−4 + 𝑥𝑀
𝑥 = 0.04982𝑀
500 ml HCOOH ( 0.1 mol / 1L) = 0.05 M
5 ml KOH (1 mol / 1L) = 5 x 10*-3 KOH

𝑝𝐻 = − log[𝐻 +]
3.75 = − log[𝐻 +]
 𝐻+= 1.778 𝑥 10 ∗ −4 𝑚𝑜𝑙

0.04982 + 5𝑥10 ∗ −3
𝑝ℎ = 3.75 + 𝑙𝑜𝑔
0.05 𝑥 5𝑥10 − 3

𝑝𝐻 = 3.8357
5. Describa la preparación de 2.0 litros de tampón glicina 0.100 M,
pH 9.0, a partir de glicina(PM en forma de zwitterion, 75.07 g/mol)
y NaOH 1.00 M. El pK de la glicina es 9.6.

Para hallar la concentración de la glicina tenemos que aplicar una

operación a la inversa
[𝑠𝑎𝑙 ]
𝑝ℎ = 𝑝𝐾𝑎 + 𝑙𝑜𝑔
[á𝑐𝑖𝑑𝑜]
[𝑠𝑎𝑙]
9 = 9.6 + 𝑙𝑜𝑔
[á𝑐𝑖𝑑𝑜]
[𝑠𝑎𝑙]
−0.6 = 𝑙𝑜𝑔
[á𝑐𝑖𝑑𝑜]
[𝑠𝑎𝑙]
𝑎𝑛𝑡𝑖𝑙𝑜𝑔 0.6 = = 0.62511
[á𝑐𝑖𝑑𝑜]
Entonces aplicando una regla de 3, calculamos la cantidad de moles
que necesitamos de ambos elementos
[𝑔𝑙𝑖𝑐𝑖𝑛𝑎] = 0.02007
[𝑁𝑎𝑂𝐻 ] = 0.07993
Luego calculamos la cantidad en ml que necesitamos por medio de
una regla de 3

8. REFERENCIAS
1. Navarro O.R.; Mestas V., B. (2022). Práctica 2: Calorimetría y fotometría.
Manual de Prácticas de Bioquímica p. 6-18.
2. Martínez, M. (s. f.). Colorimetría. Recuperado 28 de septiembre de 2022,
de [Link]